zeta life轉(zhuǎn)染造血干細(xì)胞(HPCs)共轉(zhuǎn)染2種質(zhì)粒DNA（IF11.556）論文分享

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一、 轉(zhuǎn)染造血干細(xì)胞(HPCs)或造血祖細(xì)胞-共轉(zhuǎn)染兩種質(zhì)粒DNA文章概述：

檢測特異性蛋白Sp1對FcγRIIB的影響在造血干細(xì)胞（HPCs ）中表達，F(xiàn)cγRIIB 啟動子區(qū)域為(-1500 ~ +1從轉(zhuǎn)錄起始位點)，合成并亞克隆到pGL3載體, Sp1結(jié)合位點 5'-GGGGCGGGGC突變?yōu)?5'-AAGGCAAGGC，含有 Sp1過表達或含有模擬物。

使用美國Zeta Life公司Advanced DNA RNA轉(zhuǎn)染試劑（#AD600025，Zeta Life, USA）對造血干細(xì)胞（HPCs ）共轉(zhuǎn)染 1 μg 報告載體和 20 ng pSV-Renilla 表達載體（含、模擬物和 Sp1），轉(zhuǎn)染的細(xì)胞是孵育 48 小時后收細(xì)胞并檢測。

文章作者：重慶大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院腫瘤內(nèi)科IF11.556

標(biāo)題：FcγRIIB potentiates differentiation of myeloid-derived suppressor cells to mediate tumor immunoescape

二、轉(zhuǎn)染造血干細(xì)胞(HPCs)

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FcγRIIB promoter luciferase reporter assay

To measure the effect of Sp1 on FcγRIIBexpression in HPCs, the FcγRIIB promoter region

(-1500 ~ +1 from the transcription starting site) wassynthesized by GenScript co., LTD (Nanjing, China)and subcloned into pGL3-basic vector (Promega,Madison, WI, USA), Sp1 binding site 5’-GGGGCGGGGC was mutated to 5’-AAGGCAAGGC.Lentivectors containing Sp1 overexpression or a lentivector containing mock were obtained from Genechem (Shanghai, China). The HPCs were transfected with 1 μg of reporter vector and 20 ng of pSV-Renilla expression vector (mock and Sp1) using Advanced DNA RNA Transfection Reagent (Cat No.AD600025, Zeta-life). Transfected cells were incubated for 48 h, Luciferase and Renilla activitie were measured using the dual-luciferase reporter system kit (Cat No. E1910, Promega). The transfection was performed according to the manufacturer' protocol.

三、美國Zeta Life 公司與美國加利福尼亞大學(xué)舊金山校區(qū)聯(lián)合開發(fā)用于哺乳動物細(xì)胞、活體動物轉(zhuǎn)染的 Advanced DNA RNA 第三代多肽小分子轉(zhuǎn)染試劑，此技術(shù)成為新的蛋白功能、免疫細(xì)胞及干細(xì)胞治療、研發(fā)及生產(chǎn)的主要關(guān)鍵技術(shù)之一。

四、文獻中所用轉(zhuǎn)染試劑產(chǎn)品信息

產(chǎn)品名稱：Advanced  DNA RNA  轉(zhuǎn)染試劑

貨號：AD600025、AD600050、AD600075、AD600150

規(guī)格：0.25ML、0.5ML、0.75ML、1.5ML

安培生物科技有限公司是美國 Zeta Life 公司的中國代理商。Advanced DNA RNA轉(zhuǎn)染試劑，均經(jīng)過反復(fù)充分驗證，轉(zhuǎn)染效果好且重復(fù)性佳，提供完整售后服務(wù)和技術(shù)支持。

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安培生物堅持為生命科學(xué)研究、活體動物轉(zhuǎn)染、大規(guī)模生物生產(chǎn)、基因和細(xì)胞治療領(lǐng)域客戶，提供*細(xì)胞體內(nèi)可代謝的核酸轉(zhuǎn)染試劑；inviCELL™Platelet lysate無動物血清產(chǎn)品旨在支持廣泛的細(xì)胞擴增和生產(chǎn)，包括培養(yǎng)間充質(zhì)干細(xì)胞和多種免疫細(xì)胞系等，為制藥公司或者生物技術(shù)公司提供無血清細(xì)胞培養(yǎng)規(guī)模生產(chǎn)服務(wù)；提供以植物生物為平臺基因序列全人源化、*的細(xì)胞培養(yǎng)可分解3D基質(zhì)膠產(chǎn)品；提供內(nèi)毒素≦ 1.0 EU/mL、對細(xì)胞無毒性影響、高純度的一型膠原蛋白產(chǎn)品。安培生物專注為生物醫(yī)藥領(lǐng)域提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù)，努力發(fā)展為基因治療、細(xì)胞治療的生物科技企業(yè)。